عزل وتنقية هرمون الكوبيبتين من مصل دم اشخاص مصابين بأمراض القلب

Abstract

شملت هذه الدراسة عزل وتنقية هرمون الكوبيبتين من مصل دم اشخاص مصابين بامراض القلب باستخدام تقنيات حيوية مختلفة فقد فصلت حزمتين بروتينية بواسطة كروماتوغرافيا الترشيح الهلامي ( سيفادكس G-50) من الراسب الناتج بواسطة الترسيب بالاسيتون البارد ولقد وجد ان اعلى تركيز لهرمون الكوبيبتين كان في القمة الثانية (الحزمة B) .

فضلا عن ذلك تم الكشف عن نقاوة هرمون الكوبيبتين المعزول والحزمة (B) بواسطة تقنيات (كروماتوغرافيا السائل عالي الاداء –الطور المعكوس و الهجرة الكهربائية) , ولقد بينت النتائج التي تم الحصول عليها بتقنية RP-HPLC تطابقا فيها جيدا في زمن الاحتباس بين المحلول القياسي للكوبيبتين ومحلول النموذج الذي تم الحصول عليه في تقنية الترشيح الهلامي (الحزمة B) .

كما تم ايجاد الوزن الجزيئي التقريبي لهرمون الكوبيبتين المنقى جزئيا الحزمة (B) باستخدام كروماتوغافيا الترشيح الهلامي سيفادكس (G-50) والهجرة الكهربائية باستخدام الصوديوم دوديسيل سلفيت كان (4654±400 دالتون , 4513±400 دالتون)على التوالي , وتم دراسة التركيب الثانوي (الفا-الحلزوني) لهرمون الكوبيبتين بواسطة تقنية (Circular Dichroesim) ووجد ان النسبة المئوية (الفا- الحلزوني) بين المحلول القياسي للكوبيبتين ومحلول النموذج الذي تم الحصول عليه بتقنية الترشيح الهلامي (الحزمة B) كانت متطابقة بدرجة عالية.